클래리트로마이신(Clarithromycin)

클래리트로마이신 Clarithromycin

(3 R ,4 S ,5 S ,6 R ,7 R ,9 R ,11 R ,12 R ,13 S ,14 R )-6-[(2 S ,3 R , 4 S ,6 R )-4-(Dimethylamino)-3-hydroxy-6methyloxan-2-yl]oxy-14-ethyl-12,13-dihydroxy4-[(2R,4R,5S,6S)-5-hydroxy-4-methoxy-4,6dimethyloxan-2-yl]oxy-7-methoxy-3,5,7,9,11,13 -hexamethyl-oxacyclotetradecane-2,10-dione [ 8110 3-11-9 ]

 

 이 약은 에리트로마이신의 유도체이다. 

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 하여 클래리트로마이신 (C38H69NO13) 950 ∼ 1050 μg (역가)를 함유한다. 

1.성    상  

이 약은 흰색의 결정성 가루로 맛은 쓰다.  이 약은 아세톤 또는 클로로포름에 녹고 메탄올, 에탄올 (95)에 녹기 어렵고 물에는 거의 녹지 않는다. 

(*밀가루같은 고운 흰색 분말, 특유의 냄새가 난다, 항생제이므로 취급에 유의할것)

2.확인시험  

2.1)  이 약 5 mg에 황산 2 mL를 넣고 흔들어 섞 을 때 액은 적갈색을 나타낸다.  

2.2)  이 약 3 mg에 아세톤 2 mL를 넣고 다시 염산 2 mL 를 넣으면 액은 주황색을 나타내고 즉시 빨간색 ∼ 짙은 보라색으로 변한다.  

2.3)  이 약 및 클래리트로마이신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.  

(*IR로 브롬화칼륨 정제법으로 시험, IR용 순도높은 브롬화칼륨을 곱게 갈아 그 안에 일정량(소량)의 검체를 넣어 다시 곱게 같이 갈아놓음. 약사발에서 곱게 갈리면 이를 대한약전에서 규정하는 IR시험법에 따라 측정. 이를 표준품/검체로 각기 한번씩 진행하여 서로의 파수를 비교한다.)

2.4)  이 약 및 클래리트로마이신표준품 10 mg씩을 클로로포름 4 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름·메탄올·암모니아수(28)혼합액(100 : 5 : 1)을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 황산을 고르게 뿌린 다음 약 105 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점은 암자색을 띠고, 그 R f 값은 같다. 

(*TLC를 올리는 것, 먼저 위에서 규정하는 이동상(클로로포름,메탄올,암모니아수)을 만들어 수조에 넣어두어 수조내를 포화시킨 다음에 건조기도 105도씨를 먼저 맞춰둔다. 검체/표준품 만들어 각기 상용품으로 있는 박층크로마토그래프용 실리카겔(먼저 15센치를 표기해둔, 연필로)에 5마이크로리터씩 점적,(점적할 때에는 점적한 점의 크기가 최대한 작게, 뿌리고 말리고 뿌리고 말리는 식으로 집중하여 하는것이 포인트이다.) 

이를 수조안에 넣고(점적한 부분이 직접적으로 이동상에 닿아서는 안된다) 표기해둔 15센치까지 이동상이 올라가는것을 기다린다. 그리고 자연건조 시킨다. 이는 모두 후드내에서 진행한다. 다 말린 박층판을 황산(황산, 강산이므로 주의, 물기에 닿으면 열기를 발생, 모든 시험에서 주의할것)을 골고루 뿌린 후(뿌리는것이다, 바르는게 아니고...) 약 105도에서 10분간 가열, 가열시 황산증기가 나오므로 극히 주의할것. 가열이 끝난 박층판을 확인하면 같은 지점에서 검체와 표준품의 점이 나타날 것이다.

3.결 정 성  

시험할 때 적합하여야 한다. 

(*현미경으로 관찰, 표준품과 비교함, 미네랄오일로 팔렛을 만들어 확인)

4.비선광도

-87 ∼ -97° (환산한 무수물로서 0.25 g, 클로로포름, 25 mL, 100 mm). 

(*검체의 수분을 먼저 측정한 뒤에 진행하는 시험. 수분값으로 무수물 250mg을 계산한 후에 클로로포름으로 녹여서 10cm셀에 넣어 비선광도 측정한다.)

5.융    점  

220 ∼ 227 ℃

(*융점측정기 사용) 

6.pH  

이 약 50 mg을 달아 메탄올을 넣어 녹여 20 mL로 한 다. 이 액 10 mL를 취하여 물을 넣어 20 mL로 하여 한 액의 pH는 8.0 ∼ 10.0이다.

(*팔콘에 넣어서 시험 진행하면 편-리함) 

7.순도시험  

7.1) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는 다 (10 ppm 이하).  

(*중금속 제4법, KP에서 규정하는 납표준액, 기준 10ppm)

7.2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3법에 따라 조작하여 시 험한다 (2 ppm 이하).   

(*밀가루같은 고운 흰색 분말, 특유의 냄새가 난다, 항생제이므로 취급에 유의할것)

7.3) 유연물질  

이 약 0.1 g을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 클래리트로마이신표준품 약 10 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법 에 따라 시험하고 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액 중 환산한 무수물로 이 약 중 개개의 유연 물질은 각각 2.0 % 이하이고, 유연물질의 합계는 5.0 % 이하이다. 다만 0.05 % 미만의 피크는 제외한다.

W s : 클래리트로마이신표준품의 취한 양(mg)  

W T : 무수물로 환산한 이 약의 취한 양(mg)  

A s : 표준액 중 클래리트로마이신의 피크면적  

A i : 검액 중 각각 유연물질의 피크면적  

∑ A i : 검액 중 클래리트로마이신 이외의 피크면적 합계

조작조건  검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건을 따른다.  

시스템적합성   시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성을 따른다.   

검출의 확인 : 표준액 2 mL를 정확하게 취하여 이동상 을 넣어 정확하게 10 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 클래리트로마이신 피크면 적은 표준액의 클래리트로마이신 피크면적의 14 ∼ 26 %가 되는 것을 확인한다.   

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL씩을 가지 고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 클래리트로마 이신 피크면적의 상표준편차는 3.0 % 이하이다.  

측정범위 : 검액을 주입한 다음 2 분부터 주피크 유지시 간의 약 5 배 범위 

(*검액 : 검체100mg/20mL이동상

  표준액 : 표준품 10mg/20mL이동상

  시스템적합성용액 : 표준액 2mL/10mL이동상(6회인젝션하여 RSD 확인, 3.0%)

  인젝션양 : 10마이크로리터

  검체를 고농도 인젝션하기 때문에 니들의 세척이나 인젝션 순서의 고려가 필요하다. 특히 시스템적합성용액이 저농도의 표준액이기   때문에 웬만해서는 먼저 인젝션 하는것이 좋다.

  그리고 컬럼세척도 중요한 부분이다.

  값 계산시 무수물로서 계산하기 때문에 사전에 수분측정이 꼭 필요하다.

  측정시간은 검액주입후 2분부터 주피크시간까지의 시간*5이다.

  정량시험과 같이 진행하여야 타임로스를 줄일 수 있음.)

8.수    분  

2.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정). 

(*수분측정용시액을 이용한 karl-fisher법)

9.강열잔분  

0.1 % 이하 (2.0 g). 

(*KP시험규정 확인)

10.정 량 법  

이 약 및 클래리트로마이신표준품 약 0.1 g (역 가)씩을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 20 mL로 한다. 이들 액 2 mL씩을 정확하게 취하여 각각 내 부표준액 2 mL를 넣은 다음 이동상을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 한 클래리트로마이신의 피크면적비 Q T 및 Q S를 구한다.

내부표준액  파라옥시벤조산프로필의 이동상용액 (1 → 20000)

(*10mg/20mL->1mL/10mL)

조작조건  

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)  

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레 스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.  

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정 온도  

이동상 : 0.05 mol/L 인산이수소칼륨시액(pH 2.0)·메 탄올혼합액(2 : 3) ◦ 0.05 mol/L 인산이수소칼륨시액(pH 2.0) :  0.05 mol/L 인산이수소칼륨시액에 인산을 넣어 pH 2.0으로 조 정한다.  

유  량 : 1.0 mL/분  

시스템적합성   

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 내부표준물질, 클래리트로마이신의 순서로 유 출하고 분리도는 1.5 이상이다.   

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL씩을 가지고 위의 조건 으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 한 클래리트로마이신의 피크면적비의 상표준편차는 1.0 % 이하이다.

(*유연물질 시험과 같이 진행, 컬럼온도 먼저 높여놓고 이동상 흘려놓을것, 먼저 분리도 확인할것, 상표준편차 확인을 위해 6회 인젝션 꼭 확인)

저 장 법  

밀폐용기.